上（shàng）海秉越電子儀器有限公司

培養基的滅菌及使用

1.每次配置時，要注意其生產日期是否在保質期內，查看其開瓶（píng）日期及瓶口密封性，保證其未（wèi）變質，並（bìng）且未吸潮。
2.培養基配（pèi）置時，稱量要準確，包括鹽水（shuǐ）的分裝要準確。
3.一定要保證現配製現滅菌，未滅菌的配好培養基不能長時間放置，更不可隔夜。
4.滅菌時要保證恒溫、恒壓，同時要保證有效滅菌時間。
5.滅菌過的培養基要冰箱（xiāng）保存，可保存一周，一般不超過 3 天。而（ér）且要遵循“先（xiān）入先出”原則，先配（pèi）製（zhì）的要先（xiān）使用。
6.在使用時，要根據（jù）當（dāng）班次的使用量，用水浴鍋先將培養基溶化為液態，然後及時調低水域溫度（先化好的可從水域取出，放在水浴鍋鍋蓋上）待用，千萬（wàn）不可長時間使培（péi）養（yǎng）基處於（yú）高溫（wēn）狀態。
7.做產品微（wēi）生物檢測時，傾倒培養基溫度在 45℃左右，不可過（guò）燙，避免將菌燙死；也不可過涼，化好的培養基又結塊凝固，不便於觀察結果（guǒ）。
8.每瓶培養基均要做空（kōng）白。
9.盡量集中做樣，避免頻繁打開同一瓶（píng）培養（yǎng）基（jī）瓶塞，增大培養（yǎng）基的汙染幾率，出現誤差結果。
10.培養基剩餘過少時（shí），可先將其（qí）傾倒成空白用板。

做樣環境（jìng）的維持

一、大環境（jìng）（房間）
1.做樣時，窗戶（hù）和空調要關閉，或（huò）用酒精對房間進行（háng）噴霧（wù）消毒（dú），避免房間內空氣流通影響超淨台內部（bù）環境（在有通（tōng）排風係統的恒溫恒濕無菌間（jiān）進行操作）。
2.如果在原來的原料微生物檢測室進行做樣，要定期開啟紫外燈，對房間進行殺菌。
二、小環境（超（chāo）淨台（tái））
1.定期清潔初效過濾器，要及時更換。
2.做樣前，將超（chāo）淨台內部進行清潔，用 75%酒精進行擦（cā）拭消毒，並提前半小時將超淨台紫外燈打開，對超淨台內部環境進行殺菌。
3.關紫外燈，開風機，調整合適進風量，風量不（bú）可過（guò）低。
4.每次做樣後，要對超淨台內部進（jìn）行清理、清潔，並用 75%酒精進行擦拭消毒。
5.紫外燈根據其使用壽命要及時更（gèng）換。
6.做樣同時，要做上相應菌落檢測（cè）的環（huán）境空白。
7.做樣區域的選擇：
①一般在距離（lí）超淨台外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操（cāo）作；
②要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。

 工器具的潔淨度（dù）

1.玻璃器皿：采用幹熱滅菌方式進行滅菌。

2.做樣用剪刀、勺子等物品要（yào）做到做樣專用，不（bú）可與其它操作（zuò）器具混用，使用時（shí），先用75%酒精消毒，再采用灼燒方式進（jìn）行滅菌。

3.接種針（環）采用灼燒方式進（jìn）行滅菌，但要注意做樣（yàng）時要先將接種針（環）進行冷卻。

樣品的采集及檢測

一、保證采樣器具的無（wú）菌性（xìng）
1.玻璃（lí）器皿：采（cǎi）用幹（gàn）熱滅菌方式（shì）進行滅菌，保證恒溫、時間足夠（但（dàn）不可時間過長，導致玻璃器皿易裂紋而報廢）。
2.取樣筐：使用前要用 75%酒精進行噴灑消毒
3.取樣勺、濃奶取樣提子：要（yào）保證其（qí）清潔消毒，清潔後（hòu）用 75%酒精（jīng）進行（háng）擦拭消毒（dú）。
4.取樣袋：可現（xiàn）用酒精進行擦拭消毒，再（zài）在超淨台用紫（zǐ）外燈照射消毒，（包裝車（chē）間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒）。
5.電子稱表麵用 75%酒精消毒。

二、人員操作
1.保證手部的清洗（xǐ）、消毒：取樣前（qián）及做樣前都（dōu）要先洗手再消毒。
2.取樣要具有代表性（隨機（jī）樣、目的（de）樣、綜合樣）且要標示（shì）清楚。
3.取樣完畢（bì），不可在車間逗留，要及時將樣品放入超（chāo）淨台，對其（qí）外表麵進行紫外燈照射消毒。
4.在要求的（de）做樣區域進行操（cāo）作（zuò）。
5.做樣前，要用 75%酒精棉球對樣品袋口部（bù）進行擦拭消毒，再開口。
6.往鹽（yán）水瓶加樣品時，要注意勺（sháo）子或袋子盡量不接觸瓶口。
7.樣品計量要準確，稀釋倍數也要準確（1mL 吸管不允許將管口敲掉），進（jìn）行（háng） 100 倍稀釋（shì）時，1mL 吸管（guǎn）要伸入鹽水（shuǐ）中，不可以將樣品管（guǎn）壁流下去，同時要避（bì）免將管底部捅（tǒng）破。
8.鹽水溫度以 40℃左右為宜，不（bú）能過（guò）熱，將部分微生物燙死，也不能溫（wēn）度（dù）太低，不能將奶粉溶解完全。
9.進行稀釋時，要搖勻，保證溶液的均一性。
10.傾倒平皿時，要注意培養基瓶口不要接觸到平皿；傾（qīng）倒的培養基要適量，不可以（yǐ）太少，在培養過程中幹掉（diào），微生物亦死亡，以 15mL 左右（yòu）為宜。
11.做大腸菌群樣時，要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好，放入超淨台對外表麵進行紫外線滅菌。
12.接二步（bù）時，要注意先將接（jiē）種針（環（huán））進行冷卻，避（bì）免（miǎn）出現接不上菌落的情況發生（shēng），導致無法判斷、確認。
13.做（zuò）樣完畢，及（jí）時放入相應培養箱進（jìn）行培養，並清理清潔超（chāo）淨台。