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一、微生物實驗室注意事項

1、工作室要矮小平（píng）整、光滑、無凹凸不平或棱角、四（sì）壁及屋頂用不透水之材質，便於擦洗及殺菌。

2、室內采光麵積應大，從室外應能看到室內的情況。

3、為保證無（wú）菌室的潔淨，無菌室周圍需設緩（huǎn）衝走廊，走廊旁再設緩衝間，其（qí）麵（miàn）積可小於無菌室。

4、無菌室、緩衝走廊及緩（huǎn）衝間均（jun1）設有日光燈及紫（zǐ）外燈，殺菌紫外（wài）燈離工作台以（yǐ）一米為宜，其電源開關應設在室（shì）外。

5、無菌室與緩衝間進出口應設推拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門要錯開，以免空氣對流造成汙染。

二、使用無菌室注意事項

1、無菌室要保持清潔（jié）整齊，室內（nèi）僅存（cún）放（fàng）必要的檢驗用品，如：酒精燈（dēng）、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接（jiē）種環、記（jì）號鉛等。

2、室內檢驗用具及（jí）桌凳應（yīng）保持固定（dìng）位置，不隨（suí）便移動。

3、每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭工作台、門、窗、桌凳及地麵，然後用二氧（yǎng）化氯溶液噴霧消毒空氣或（huò）過氧乙酸（suān）熏蒸，紫外燈殺（shā）菌。

4、定期檢查室內空氣無菌狀態，進（jìn）行細菌和黴菌的檢查。

5、無菌室殺菌前應將（jiāng）所有物品置於操（cāo）作之部位，然後打開紫外燈殺菌半小時，時（shí）間一到，關閉紫外燈待用（yòng）。

6、操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作（zuò）少說話（huà），不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。

三、配製培（péi）養基注意事項

1、滅菌時嚴格（gé）按（àn）照規定加熱、加壓（yā），切忌時間過長壓力過高，否則會造成營養成（chéng）分的破壞。

2、切忌（jì）使用銅鍋、鐵鍋（guō）配製培養基。

3、培養基不能二次高壓滅（miè）菌。

4、劃線用培養基可放入冰箱或培養箱除去水分。 

四、無菌操作注意事項

1、進入無菌室之前先進行空氣消毒，工作人（rén）員進入（rù）無（wú）菌室以前，必須於緩衝間更換消毒過的工（gōng）作服、工作帽及工作鞋。

2、動作要輕，盡量減少走動（dòng），以免攪動（dòng）空氣。

3、操作要靠近酒精燈火焰區，使用（yòng）吸管要（yào）用吸球。

4、接種環/接種針用前用後進行火焰滅菌。

5、工作結束作好終末消毒（dú），所有培養物均應高（gāo）壓滅菌後再扔掉（diào），以免汙染環（huán）境。

 

五、菌落總數測（cè）定注意事項

1、選取樣（yàng）品要有代表性，如（rú）為固（gù）體樣品要多采（cǎi）幾個部位，液體檢樣要混勻。

2、每次做樣從開始（shǐ）到結束都要進行超淨台空氣淨度的監（jiān）測，同時對所有（yǒu）滅菌物（wù）品（pǐn）做空白對照。

3、為減少稀釋倍數的誤差，在做連續遞增稀釋時，每一（yī）稀釋液應充（chōng）分振搖使其均勻，同時每一稀釋度換一支（zhī）吸管（guǎn）。

4、在進（jìn）行（háng）連續稀釋（shì）時，應將吸管內液體沿壁流入，勿使吸管尖端觸及稀釋液。

5、傾倒營（yíng）養瓊（qióng）脂培養基平（píng）板時，溫度要在46±1℃之間，數量要在15ml左右為宜，不要太多太（tài）少。

6、培養物48h培養後（hòu）培養基失重不超過15%，培養箱（xiāng）內要放水。

7、檢樣加入平皿後應（yīng）立即傾注培養基並旋轉混勻，一般從稀釋到傾注不超過20分鍾。

8、平皿內如有鏈（liàn）狀菌落生長時：菌（jun1）落之間無明顯界限且僅有一條鏈可視為一個菌落，如為（wéi）不同來源的幾條（tiáo）鏈則將每條鏈各做一個菌落記。

9、做菌落記數時平板裏所有的菌落都要記數。

 

六、大腸菌群注意事（shì）項

1、對乳糖（táng）膽鹽管產氣的觀（guān）察隻要有氣泡往上冒（mào）就算產氣。

2、在伊紅美蘭瓊脂平（píng）板上挑取菌落時一定要選典型菌落。

 

七、黴菌、酵母菌（jun1）檢驗注意事項

1、稀釋樣品時用無菌（jun1）水。

2、3天觀察時把所有的酵母菌做（zuò）標記。

3、如果有黴（méi）菌被培養出（chū），請不（bú）要把皿（mǐn）蓋隨便打開，待（dài）培養（yǎng）物（wù）高壓滅菌後再清（qīng）洗。

 

八、壞包分析注意事項

1、對已開（kāi）包的酸（suān）包脹包要馬上轉移到無菌瓶中，已防二次汙染。

2、根據壞包的（de）不同表現狀態適當的選擇（zé）培養項（xiàng）目。

3、做微生物培養的同（tóng）時測定感官、理化指標（biāo），注意其有何變化（huà）。

 

九（jiǔ）、商（shāng）業無菌注意事項（xiàng）

1、要求有厭氧培（péi）養的一定要在厭氧環境下培養。

2、取樣測pH值，要與同（tóng）批正常樣（yàng）相比，看是否有顯著差異。

3、對pH 值有可疑的樣品都要做塗片染色鏡檢，與同批正常樣相比，看是否有明顯的微（wēi）生物增殖現象。

4、保溫期間出現的脹包，漏包（bāo）、或開包發現PH、感官異常、變質，進一步鏡檢發現有異（yì）常數量細菌的樣（yàng）品均應進行劃線培養。